생명과학5 세포 배양 시 passage 측정 오늘 새롭게 알게 된 지식 세포를 1년을 키웠지만...처음 알게되어 기록한다.먼저, 세포 passage는 내가 몇번의 배양을 했는지 측정하는 간단한 방법이다. 암세포같은 불멸화 세포들은 계대배양 후 셀을 얼릴때 Passage를 올리지 않는다고 한다. Ex) p.3 cell->계대배양-> 얼릴때 p.3으로 기록 그러나 Hdlec같은 한계가 있는 세포(최대 p.10)들은 계대 시 passage를 하나씩 올린다 얼린 셀을 풀때는 passage를 올리지 않고 바이알에 적힌 그대로 기록한다 2024. 11. 15. E.coli prep 및 일반 PCR 실험 - DNA prep method1) 1.5 mL tube에 Labeling2) 1.5 mL tube에 Proteinase K ....20uL 첨가, E.coli 200uL첨가, GB buffer 200uL 첨가3) vortexing 후, spin down, incubation 60도 10min4) Incubationg 60 °C, 10min5) 99% EtOH 400 uL 첨가 후 pipetting6) Binding column을 collection Tube에 장착 후 820 uL용액 전체를 옮김7) Centrifuge 8000rpm, 1min8) 내려간 Solution 제거, Binding Column을 Collection Tube에 다시 장착9) WA1 500 uL 첨가10) Centrifuge 8.. 2024. 5. 1. mutation의 종류와 특징 돌연변이 종류와 특징-돌연변이(mutation): DNA 뉴클레오타이드 서열에 있어서 영구적인 변화를 돌연변이라 한다. 돌연변이1) 유전자 돌연변이: DNA 치환, 첨가, 결실point mutation: DNA 염기하나에 일어나는 변화 (유전자 내 염기서열 변화로 뉴클레오티드 소실, 혹은 추가) -> 아미노산 변화 -> 단백질 구조 변화 - point mutation 종류● 침묵 돌연변이: 돌연변이가 필수적이 아닌 DNA에 생긴다거나 어떤 유전자의 기능에 무시할 정도의 영향밖에 미치지 않을 경우 / 단백질 암호화 서열에서 염기서열은 변화했지만 단백질 코돈은 존재 X● 중립 돌연변이: 아미노산 서열이 변화하지만, 그 성질이 비슷한 아미노산으로 변화하는 경우 ● 미스센스 돌연변이: 염기서열이 변하면서 단백.. 2024. 3. 24. 6. phage titration protocol -introduction : 특정 용해물에서 plaque 형성 단위 PFU의 밀도를 정량화한다. 재고 현탁액에서 실행가능한 파지입자의 수를 결정한다. -methode a. 3mL soft LB agar(l)와 살모넬라(LT-2) 100 μL를 voltexing 한다. b. a용액을 LB plate에 넣고 알코올램프 근처에서 굳힌다. c. phage (p22) 원액을 희석한다. (10^-1~10^-8까지 진행한다.) =1.5 mL tube에 90 μL LB와 10 μL phage를 넣고 up and down 2번 진행 d. plate labeling 한다. e. 왼쪽부터 10^-6, 10^-7, 10^-8 10 μL 씩 접종한다. f. 37도 인큐베이터에서 배양하고 plaque 관찰한다. -Result P.. 2023. 11. 21. Functional polarization of tumour - associacted macrophages by tumour - derived lactic acide published: 2014/ 07/ 13, nature https://doi.org/10.1038/nature13490 ＊정의 LLC: 루이스 폐 암종(Lewis lung carcinoma) B16 cell: 흑색종 암세포 Vegf: vascular endothelial growth factor = 혈관 내피 성장 인자 Arg 1: arginase 1 PM: 복막 대식세포 TAM: 종양 관련 대식세포 M2: 대식세포 종류 AO : 다른 세포(종양 X) ＊배경 : Macrophages는 조직 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. TAM도 정상 대식세포와 비슷하게 종양 조직의 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 대식세포에 의해 아르기나아제(Arg1)의 젖산 유도가 발현되면 이는 종양 성장에 중요한 역할을 한.. 2023. 8. 14. 이전 1 다음
