생명실험2 5. phage transduction -introduction : phage는 카나마이신(항생제) 저항성을 갖고 있고 살모넬라는 항생제 내성이 없다. 따라서 Km배지에는 살모넬라는 자랄 수 없고 phage가 transduction 된 살모넬라만 성장할 수 있다. -방법 a. 37도 O/N배양한 살모넬라 전 배양액을 사용한다. b. tube에 LT-2(살모넬라) 200 ml와 phage(50 μL)를 넣고 tapping 한다. c. 상온에 10분 방치(=rt 10분) d. 카나마이신 배지에 1000 μL LT-2 spreading 한다. (CTL) e. LB배지에 1000 μL LT-2 spreading 한다. (CTL) f. 카나마이신 배지에 b용액을 100 μL spreading한다. g. spreading전에 배지에 labeling 한다.. 2023. 10. 31. 3. 무균 조작법(선상도말평판배양법) -introduction : 보관된 미생물 시료로부터 매번 단일 집락을 구성하도록 접종하여 배양하는 것은 해당 세포의 고유한 특성 보존에 매우 중요하다. 고체배지상에서 단일 클론이 나타나도록 Loop를 이용하여 접종한다. - 실험 방법 1. 70% 에탄올을 뿌리고 종이 타월로 닦아 실험 work zone을 소독한다. 2. 세균 접종한 LB배지에 유성펜을 사용하여 균주명과 날짜를 표시한다. (labeling) 3. 열처리를 하여 멸균된 접종 Loop를 충분히 식히고 LB에서 하루 배양된 E.coli를 긁어낸다. 4. 배지의 한 부분에 세균을 조심히 줄 긋듯이 지나간다. (한번) 5. 접종 Loop를 다시 열처리 하고 식힌 다음 한번 접종한 줄에서 끌어다가 줄 긋기를 계속한다. (두 번) 6. 동일한 벙법으.. 2023. 10. 31. 이전 1 다음
