실험5 MTT assay 오늘은 세포 실험에서 추출물의 세포독성을 확인하는 방법인MTT assay를 소개하고자 한다.-목적추출물이나 화합물이 세포독성을 갖고있는지 확인하기 위해invitro에서 실험하는 방법이다.-method1. 세포 배양10^4개만큼 96well plate에 seeding 한다.37도 OE 처리한다. 2. 추출물 처리추출물을 농도에 맞게 희석하고 시간에 맞게 처리한다. 3. MTT시약처리basal medium과 MTT 시약을 96well에 처리하고 3시간 incubation 처리한다.MTT 용매 150uL를 96well에 처리한다.오비탈 세이커에 15분 처리한다.흡광도를 측정한다. 2024. 11. 24. [약제학 실험] 현탁제 만들기 Method① 비커 A에 정제수 30 mL, Saccharose 7 g, Glycerin 1 g을 넣고 magnetic bar를 이용하여 교반하며 용해시킨다.② 교반중인 비커에 칭량종이를 이용하여 Xantangum 80 mg을 천천히 넣는다.③ 거품이 많이 생기지 않도록 후반에는 천천히 교반시킨다.④ 비커 B에 정제수 30 mL에 Saccharose 7 g, Glycerin 1 g을 넣고, magnetic bar를 이용하여 교반하며 용해시킨다.⑤ 비커 C에 Polyoxyl 40 Hydrogenated Caster Oil 300 mg, Kaolin 2000 mg과 ASA 0.25 g & 정제수 30 mL을 넣고 magnetic bar를 이용하여 교반하여 혼합시킨다.⑥ 비커 A에 비커 C용액 5 mL을 넣는.. 2024. 10. 2. Bovine adenovirus 정량 검출을 위한 Taqman Probe Realtime PCR date.24.05.14 1. introductionBovine adenovirus-가장 흔하게 감염되는 바이러스 중 하나-소 유래 물질을 원료로 하는 생물의약품, 조직공학제제, 세포치료제 등에서 BADV 안정성 확보를 위해원료물질, 제조공정, 완제품에서 BADV를 정량적으로 검출하고 제조공정에서 BADV 제거 검증을 위한 시험법으로 활용이 가능하다. Taqman probe-5'말단은 형광물질, 3'말단은 형광억제물질로(Quencher) 수식한 Taqman Probe를 PCR 반응액에 첨가한 반응이다.-Extension 반응 시에 Taq DNA polymerase가 갖는 5'->3' Exonulease 활성으로 template에 hybridze한 taqman probe가분리되어 형광색소가 probe에 .. 2024. 6. 29. 2. LB배지 제조 -introduction LB배지의 조성 : tryptone(탄소원, 질소원으로 사용) yeast extract( 영양소, 유기화합물 공급) NaCl( 삼투압 조절) agar(고체 배지로 만들어준다)-실험방법 1. 구성 성분 g 계산하기2. 전자저울을 이용하여 계산한 성분들을 Erlenmeyer flask에 넣는다. 3. 150 mL 증류수를 Erlenmeyer flask에 넣고 잘 섞는다, (마그네틱 바 이용) 4. autoclave 하고 50-60°C 항온수조에 넣어 온도를 낮춘다. 5. petri dish에 분주한다. 6. 굳으면 뚜껑이 바닥으로 향하도록 뒤집어 놓는다. 7. 완성한 배지는 냉장 보관한다.-discussion 페트리디쉬 뚜껑이 아닌 바닥에 이름을 적는 이유는 실험 중 타 실험자와 뚜.. 2023. 9. 22. 1. 멸균법 실험 방법 1. 대장균 배양액과 고온고압 멸균한 동일 배양액을 10 microliter씩 취하여 LB배지에 떨어뜨린다. 2. 대장균 배양액을 LB brother를 이용하여 1/100으로 희석하고, 여기에 5mL 취하여 멸균된 시험관에 여과 멸균한다. 희석한 배양액과 여과멸균액 각각 10 microliter를 취하여 LB배지에 배양한다. 3. 접종액이 건조되면 뒤집어서 37도 배양기에 넣고, 하룻밤 배양하여 증균 상태를 확인한다. Result Discussion : 이번 실험은 autoclave와 filter를 통한 멸균법에 대한 실험이다. 실험은 E.coli 배양액과 autoclave 한 동일 배양액을 LB 액체 배지를 이용해 1/100배 희석하여 진행하였다. LB부분에는 LB 액체 배지, E.coli에.. 2023. 9. 18. 이전 1 다음
