Gardening76 3. 무균 조작법(선상도말평판배양법) -introduction : 보관된 미생물 시료로부터 매번 단일 집락을 구성하도록 접종하여 배양하는 것은 해당 세포의 고유한 특성 보존에 매우 중요하다. 고체배지상에서 단일 클론이 나타나도록 Loop를 이용하여 접종한다. - 실험 방법 1. 70% 에탄올을 뿌리고 종이 타월로 닦아 실험 work zone을 소독한다. 2. 세균 접종한 LB배지에 유성펜을 사용하여 균주명과 날짜를 표시한다. (labeling) 3. 열처리를 하여 멸균된 접종 Loop를 충분히 식히고 LB에서 하루 배양된 E.coli를 긁어낸다. 4. 배지의 한 부분에 세균을 조심히 줄 긋듯이 지나간다. (한번) 5. 접종 Loop를 다시 열처리 하고 식힌 다음 한번 접종한 줄에서 끌어다가 줄 긋기를 계속한다. (두 번) 6. 동일한 벙법으.. 2023. 10. 31. 2. LB배지 제조 -introduction LB배지의 조성 : tryptone(탄소원, 질소원으로 사용) yeast extract( 영양소, 유기화합물 공급) NaCl( 삼투압 조절) agar(고체 배지로 만들어준다)-실험방법 1. 구성 성분 g 계산하기2. 전자저울을 이용하여 계산한 성분들을 Erlenmeyer flask에 넣는다. 3. 150 mL 증류수를 Erlenmeyer flask에 넣고 잘 섞는다, (마그네틱 바 이용) 4. autoclave 하고 50-60°C 항온수조에 넣어 온도를 낮춘다. 5. petri dish에 분주한다. 6. 굳으면 뚜껑이 바닥으로 향하도록 뒤집어 놓는다. 7. 완성한 배지는 냉장 보관한다.-discussion 페트리디쉬 뚜껑이 아닌 바닥에 이름을 적는 이유는 실험 중 타 실험자와 뚜.. 2023. 9. 22. 1. 멸균법 실험 방법 1. 대장균 배양액과 고온고압 멸균한 동일 배양액을 10 microliter씩 취하여 LB배지에 떨어뜨린다. 2. 대장균 배양액을 LB brother를 이용하여 1/100으로 희석하고, 여기에 5mL 취하여 멸균된 시험관에 여과 멸균한다. 희석한 배양액과 여과멸균액 각각 10 microliter를 취하여 LB배지에 배양한다. 3. 접종액이 건조되면 뒤집어서 37도 배양기에 넣고, 하룻밤 배양하여 증균 상태를 확인한다. Result Discussion : 이번 실험은 autoclave와 filter를 통한 멸균법에 대한 실험이다. 실험은 E.coli 배양액과 autoclave 한 동일 배양액을 LB 액체 배지를 이용해 1/100배 희석하여 진행하였다. LB부분에는 LB 액체 배지, E.coli에.. 2023. 9. 18. Hypoxia-induced macropinocytosis represents ametabolic route for liver cancer published: 2022/ 02/ 17, nature 링크: https://doi.org/10.1038/s41467-022-28618-9 *정의 HCC: 간암세포종 HIF: 저산소 유발 인자 HIF-1: EHD2 전사 활성화 -> 대식세포 활성화 EHD2: 막 주름 단백질인 EH 도메인 함유 단백질 2 EHD: 원형질막의 지질과 상호 작용하고 원형질막 곡률을 유지하여 소포 형성을 위한 막 분열 유도, 세포내 과정 제어하는 다이나민 관련 ATPase이다. Tf: 트랜스퍼린 MP저해제: EIPA, IPA-3, BafA1, CQ figure.1 hypoxia가 HCC cell에 어떤 영향을 주는지 알아보기 위한 실험으로 그림 a,b를 통해 덱스트란 흡수 및 MP(macropinocytosis)가 hypox.. 2023. 8. 21. Functional polarization of tumour - associacted macrophages by tumour - derived lactic acide published: 2014/ 07/ 13, nature https://doi.org/10.1038/nature13490 *정의 LLC: 루이스 폐 암종(Lewis lung carcinoma) B16 cell: 흑색종 암세포 Vegf: vascular endothelial growth factor = 혈관 내피 성장 인자 Arg 1: arginase 1 PM: 복막 대식세포 TAM: 종양 관련 대식세포 M2: 대식세포 종류 AO : 다른 세포(종양 X) *배경 : Macrophages는 조직 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. TAM도 정상 대식세포와 비슷하게 종양 조직의 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 대식세포에 의해 아르기나아제(Arg1)의 젖산 유도가 발현되면 이는 종양 성장에 중요한 역할을 한.. 2023. 8. 14. Oncogenic KRAS supports pancreatic cancerthrough regulation of nucleotide synthesis published: 2018, Noember 23 nature, https://rdcu.be/dixxO *정의 pancreatic cancer : 췌장암 PDAC : 췌장 도관 선암종(췌장암 가장 흔한 종류), 종양 미세 환경 형성 CDKN2A, TP53, SMAD4 : 종양 억제 유전자의 돌연변이 IC 50: 기존 물질을 일정 시간 동안 노출시켰을 때, 세포 생존율을 50%까지 감소시키는데 필요한 농도, 용량 AZD8330 : MEK 억제제 ECAR : 세포 외 산성화율 DHODH : 디히드로오로테이트를 오로테이트로 변환할 수 있도록 하는 피리미딘 생합성 경로의 효소 *배경 : cancer cell은 세포 증식을 위해 energy와 뉴클레오티드가 많이 필요하다. normal pathway에서 원하는 m.. 2023. 8. 7. 이전 1 ··· 8 9 10 11 12 13 다음